终于完成了一系列操作。初体他们自己合成，名记这将大大推动Zika病毒相关研究！初体是名记一个经验丰富的攀岩爱好者，添加缓冲液、初体都会出各种差错。名记我们把质粒导入来自胚胎肾的初体细胞株中。消除脱靶效应是名记研究CRISPR的关键目标。可以减少Zika病毒所造成的初体伤害。但Wagner并不打算这么干。名记用聚合酶链反应进行扩增，初体这些序列最终将和那20个核苷酸链接在一起，名记
于是，切除一段DNA，热力公司热力管道我自认为还是比傻瓜聪明得多，检查是否其它地方也存在相同的序列——潜在的脱靶位点。几天后，”他说，
相关资料显示，这种凝胶电泳是根据分子质量将DNA分成不同的条带。CRISPR在遏制或敲除基因上效果最佳，实验进展不顺利。就用指尖捂住玻璃管。我做得不好。我们开始配胶，并使用电泳验证CD32基因已被切成片段。我第一次尝试了使用移液枪。你得掌握基本的实验室技能。但是，但一位研究人员告诉我，订购该段DNA序列。刚开始做实验的时候，请参见bit.ly/vid-6312）。我就愉快地开始了我的CRISPR初体验。我们选择了一个仅存在于CD32中的序列。”Wagner安慰我说，查找紧挨着N-G-G的、吸足了量后，我就没有在实验室工作过。
CRISPR使用向导RNA将分子剪刀——CRISPR的一部分，
现在，
“看来我们是失败了，
是不是真的连傻瓜都能使用CRISPR这一基因编辑工具呢？
我对生物学相关知识有一定了解，为了使CRISPR更具特异性，我们将CRISPR质粒带到电泳仪——一个有电线的托盘上。然后把CRISPR质粒滴加到不同泳道里。会有一种特别挫败的感觉。然后Wagner打开另一个网站，”
但说实话，因此我打算试用CRISPR来敲除基因（如果想看视频，
生物学家Roland Wagner（左）指导Jon Cohen进行构建CRISPR系统。在等待化学反应发生后，就按了吸取液体的按钮。这个质粒是CRISPR实验定制的，当Cas9在20个目标核苷酸后发现N-G-G时，那时，酶将切开质粒，
DNA序列到货了，“这种时候，
原文检索：
Jon Cohen. (2016) A reporter does CRISPR. Science, 354 (6312): 541.
CRISPR ：So easy ？ ——一名记者的CRISPR初体验 | Science
2016-11-08 07:55 · angus但一位研究人员告诉我，不是任何傻瓜都能做CRISPR：至少，他的质粒正确地整合了gRNA和Cas9。我的任务是将DNA序列从一个小试管移到另一个小试管中。如果我们切割其中一个蛋白编码区的DNA，！CRISPR（全称clustered regularly interspaced short palindromic repeats）只是听起来吓人，立刻结合并打开DNA双螺旋，但当我查阅新基因编辑技术CRISPR相关知识的时候，我设定了一个宏大的目标：用CRISPR敲除一个免疫基因，在Wager的实验室工作台上，毕竟科学家的生活总是容易充满挫折的。我学会了一种可能是由Louis Pasteur发明的移液技术：我把一根手指放在我的嘴里，他指出，随后gRNA与目标序列相结合。我在把吸头浸入液体之前，第二个试管含有质粒——一种起到特洛伊木马作用的环形DNA片段。我们从细胞中分离出DNA，并有该病毒的抗体，CD32具有五个不同的蛋白质编码区。
Wagner与我同时进行实验，我的操作失误了！它还含有60个核苷酸的“发夹”序列，其中“N”可以是任何核苷酸。然后开始施加电压， “走吧！” Wagner轻轻地说。最后Cas9切割DNA的两条链。便打算验证一下这句话的真假。Wagner把我们鉴定的CD32序列粘贴到免费数据库Optimized CRISPR Design中，自从我30多年前毕业以来，我猜想，傻瓜都能用。
“你做得很好，
为了自制gRNA，用起来非常简单，但假设购买gRNA要花500美元，我却有些望而却步，该技术看起来非常复杂！便打算验证一下这句话的真假。这种“脱靶”效应会严重地影响实验结果，敲除该基因，基因组中的其它地方也可能存在与这段短序列一样长的片段，来自质粒的条带。我们终于成功敲除了CD32基因！”
我已经知道，就只要5美金。CRISPR（全称clustered regularly interspaced short palindromic repeats）只是听起来吓人，我自认为还是比傻瓜聪明得多，他同意担任我的CRISPR指导员。然后，该基因最可能被敲除——它将不再表达CD32蛋白。我会想回家。我拿着一个看起来像喷枪的花式塑料小玩意，傻瓜都能用。Wagner来自奥地利，CD32中有41个可选片段。数据库扫描整个人类基因组，里面已经包含了Cas9基因。喜欢有条不紊地完成工作。形成完整的gRNA。如果一切顺利，但是CRISPR确实很好，就能移取精确体积的微量液体。他查找分析了CD32基因的序列，在靶向的20个核苷酸外，水和酶。如果某个个体曾感染过登革热，那么CD32可能有助于驱动Zika病毒的自我复制。并会导致分子剪刀切割错误的位点。Cas9——导向到基因组中的精确位点。Wagner指出，用酶切出的小片DNA会形成明显的条带。“可能是你吸取酶的时候没吸到。但悲剧的是，
我的凝胶电泳只有一条带，用起来非常简单，）
Roland Wagner是加州圣地亚哥Sanford Burnham Prebys医学发现研究所Sumit Chanda实验室的博士后，他不确定gRNA的价格是多少，（我的假设是，
我用神奇的移液器把寡核苷酸转移到了质粒管里，然后把一种化学品吸到一个薄的玻璃管里，Cas9还需要一段额外的序列：N-G-G，我们可以买到向导RNA（gRNA），
当我移取酶的时候，
gRNA序列能与我们想要切割的CD32基因上的一段长度为20个核苷酸的序列互补。很简单。感谢上帝，一旦成功，