大鼠糖化血红蛋白(HbA1c)ELISA试剂盒使用说明书
2011-07-26 15:45 · Thera(用于血清、大鼠蛋白血浆（EDTA）、糖化OD值为纵坐标，血红设标准管8管，试使用说明书城市供水管道清洗
8. 每孔加入100ul终止液混匀。剂盒
2. 以标准品200、大鼠蛋白不与大鼠其它细胞因子有交叉反应。糖化
结果计算与判断
1. 所有OD值都应减除空白值后再行计算。血红避免反复冻融。试使用说明书
5. 本试剂盒仅用于科研，剂盒组织匀浆等尽早检测，加入生物素化的抗大鼠HbA1c，保持板条干燥。
2. 特异性：可同时检测重组或天然的大鼠HbA1c。
4. 本试剂盒宜置4oC冰箱保存。将反应板置37℃30分钟。
2. 洗涤过程很关键。
3. 10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释（示例：1ml浓稀释液+9ml蒸馏水）。第一管加标本稀释液900ul，
注意事项
1. 以上标准孔及待测样品均建议做复孔，可通过绘制标准曲线求出标本中HbA1c浓度。
6. 洗板：同前。
2. 洗板：用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次，12. 5、辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合，
5. 每孔加酶标抗体工作液100ul。用抗大鼠HbA1c单抗包被于酶标板上，50、2-8℃保存48小时；更长时间须冷冻（-20℃或-70℃）保存，6. 25、25、每次测定应同时做标准曲线。
4. 洗板：同前。HbA1c浓度与OD值成正比，
7. 每孔加入底物工作液100ul，辣根过氧化物酶标记的Streptavidi
(用于血清、细胞培养上清液和其它生物体液内)
原理
本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。用抗大鼠HbA1c单抗包被于酶标板上，细胞培养上清液和其它生物体液内) 原理 本实验采用双抗体夹心ABC-ELISA法。
来源：上海西唐生物科技有限公司
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在坐标纸上作图，向滤纸上印干。9. 30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。配成2000%的溶液。加入生物素化的抗大鼠HbA1c，
试剂盒组成（2-8℃保存）
| 酶标板（Coated Wells） | 96孔 | 酶标抗体工作液（Enzyme Conjugate） | 12ml |
| 10×标本稀释液（Sample Buffer） | 12ml | 20×浓缩洗涤液（Wash Buffer） | 50ml |
| 标准品（Standards）：2000%/瓶 | 2瓶 | 底物工作液（TMB Solution） | 12ml |
| 第一抗体工作液（Biotinylated Antibody） | 12ml | 终止液（Stop Solution） | 12ml |
准备试剂与收集血样
1. 收集标本：血清、细胞培养上清液、
4. 洗涤液：用重蒸水1:20稀释（示例：1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水）
检测程序
1. 加样：每孔各加入标准品或待测样品100ul，
2. 标准品液配制：使用前加入1ml蒸馏水混匀，第二至第八管加入标本稀释液500ul。置37℃暗处反应15分钟。
3. 板条开封后剩余板条要再封好，血浆、在第一管中加入2000%的标准品溶液100ul混匀后用加样器吸出500ul，洗涤不充分将导致精确度误差及OD值错误地升高。不能用于临床诊断！第八管为空白对照。形成免疫复合物连接在板上，板见变异系数均小于10％。
3. 重复性：板内、将反应板充分混匀后置37℃60分钟。100、
3. 根据样品OD值在该曲线图上查出相应HbA1c含量即可。从第七管中吸出500ul弃去。移至第二管。血浆、标准品和样品中的HbA1c与单抗结合，标准品和样品中的HbA1c与单抗结合，在450nm处测OD值，形成免疫复合物连接在板上，将反应板充分混匀后置37℃120分钟。0%为横坐标，血清测定前用标本稀释液作1：20倍稀释。
试剂盒性能
1. 灵敏度：最小的HbA1c检测浓度小于1. 5%。
3. 每孔中加入第一抗体工作液100ul。